फ्लोरोसेन्स फिल्टर म्हणजे काय?

उत्सर्जन फिल्टर

उत्सर्जन फिल्टर नमुन्यातील वांछनीय फ्लोरोसेन्स डिटेक्टरपर्यंत पोहोचू देण्याच्या उद्देशाने कार्य करतात. ते लहान तरंगलांबी अवरोधित करतात आणि दीर्घ तरंगलांबींसाठी उच्च प्रसारण करतात. फिल्टर प्रकार एका संख्येशी देखील संबंधित आहे, उदा. आकृतीमधील BA510IF (हस्तक्षेप अडथळा फिल्टर), ते पदनाम त्याच्या कमाल प्रसारणाच्या 50% तरंगलांबीचा संदर्भ देते.

उत्सर्जन फिल्टरसाठी समान शिफारसी उत्सर्जन फिल्टरसाठी सत्य आहेत: किमान ट्रांसमिशन, बँडविड्थ, OD आणि CWL. आदर्श CWL, किमान ट्रांसमिशन आणि OD संयोजन असलेले उत्सर्जन फिल्टर, शक्य तितक्या सखोल ब्लॉकिंगसह, शक्य तितक्या उज्ज्वल प्रतिमा प्रदान करते आणि सर्वात कमी उत्सर्जन सिग्नल शोधण्याची खात्री करते.

डायक्रोइक मिरर

डायक्रोइक मिरर उत्तेजना फिल्टर आणि उत्सर्जन फिल्टर दरम्यान 45° कोनात ठेवलेला असतो आणि डिटेक्टरकडे उत्सर्जन सिग्नल प्रसारित करताना फ्लोरोफोरच्या दिशेने उत्तेजना सिग्नल प्रतिबिंबित करतो. उत्तेजित फिल्टरच्या बँडविड्थसाठी >95% परावर्तन आणि उत्सर्जन फिल्टरच्या बँडविड्थसाठी 90% प्रसारणासह, आदर्श डायक्रोइक फिल्टर्स आणि बीम स्प्लिटरमध्ये कमाल परावर्तन आणि कमाल ट्रान्समिशन दरम्यान तीक्ष्ण संक्रमणे असतात. स्ट्रे-लाइट कमी करण्यासाठी आणि फ्लोरोसेंट इमेज सिग्नल-टू-आवाज गुणोत्तर जास्तीत जास्त करण्यासाठी, फ्लोरोफोरची छेदनबिंदू तरंगलांबी (λ) लक्षात घेऊन फिल्टर निवडा.

या आकृतीतील डायक्रोइक मिरर हा DM505 आहे, त्याला असे नाव देण्यात आले आहे कारण या आरशासाठी 505 नॅनोमीटर ही तरंगलांबी कमाल प्रसारणाच्या 50% आहे. या आरशासाठी ट्रान्समिशन वक्र 505 nm वरील उच्च प्रक्षेपण, 505 नॅनोमीटरच्या डावीकडे प्रक्षेपणात तीव्र घट आणि 505 नॅनोमीटरच्या डावीकडे कमाल परावर्तकता दर्शविते परंतु तरीही काही प्रसारण 505 nm पेक्षा कमी असू शकते.

लाँग पास आणि बँड पास फिल्टरमध्ये काय फरक आहे?

फ्लूरोसेन्स फिल्टर्स दोन प्रकारांमध्ये विभागले जाऊ शकतात: लाँग पास (एलपी) आणि बँड पास (बीपी).

लाँग पास फिल्टर लांब तरंगलांबी प्रसारित करतात आणि लहानांना अवरोधित करतात. कट-ऑन तरंगलांबी हे पीक ट्रान्समिशनच्या 50% मूल्य असते आणि कट-ऑनच्या वरच्या सर्व तरंगलांबी लाँग पास फिल्टरद्वारे प्रसारित केल्या जातात. ते वारंवार डायक्रोइक मिरर आणि उत्सर्जन फिल्टरमध्ये वापरले जातात. जेव्हा ऍप्लिकेशनला जास्तीत जास्त उत्सर्जन संकलन आवश्यक असते आणि जेव्हा स्पेक्ट्रल भेदभाव इष्ट किंवा आवश्यक नसतो तेव्हा लाँगपास फिल्टरचा वापर केला पाहिजे, जे सामान्यतः पार्श्वभूमी ऑटोफ्लोरेसेन्सच्या तुलनेने कमी पातळी असलेल्या नमुन्यांमध्ये एकच उत्सर्जन करणारी प्रजाती निर्माण करणाऱ्या प्रोबसाठी असते.

बँड पास फिल्टर फक्त विशिष्ट तरंगलांबीचा बँड प्रसारित करतात आणि इतरांना ब्लॉक करतात. ते फ्लोरोफोर उत्सर्जन स्पेक्ट्रमचा फक्त सर्वात मजबूत भाग प्रसारित करण्याची परवानगी देऊन क्रॉसस्टॉक कमी करतात, ऑटोफ्लोरेसेन्स आवाज कमी करतात आणि अशा प्रकारे उच्च पार्श्वभूमी ऑटोफ्लोरेसेन्स नमुन्यांमध्ये सिग्नल-टू-आवाज गुणोत्तर सुधारतात, जे लाँग पास फिल्टर देऊ शकत नाहीत.

बेस्टस्कोप किती प्रकारचे फ्लूरोसेन्स फिल्टर सेट देऊ शकते?

काही सामान्य प्रकारच्या फिल्टरमध्ये निळा, हिरवा आणि अल्ट्राव्हायोलेट फिल्टरचा समावेश होतो. टेबलमध्ये दाखवल्याप्रमाणे.